Helerio testas[pavadintas austrų patologo J. F. Hellerio vardu], kokybinio baltymo šlapime nustatymo reakcija. Remiantis baltymų krešėjimu, veikiant rūgštims. Toks pat filtruoto šlapimo kiekis atsargiai užpilamas ant 1-2 ml 50 % azoto rūgšties tirpalo.
Ties dviejų aplinkų riba, a baltas žiedas(teigiama reakcija), rodanti baltymo buvimą šlapime. Žiedas taip pat gali atsirasti dėl nukleoalbuminų ar uratų druskų; pirmuoju atveju jis išnyksta šiek tiek pakratant mėgintuvėlį, antruoju žiedas yra žymiai aukščiau terpės ribos ir išnyksta kaitinamas šlapimas. G.p.
leidžia aptikti baltymą, kurio minimali koncentracija šlapime (0,033%).
Pirmas bandymas
Pirmas bandymas Šiandien vienas vaikinas man pasakė: „Bet tu turėsi ką pasakyti savo anūkams! Koks beprotis! Lyg mano vienintelė svajonė būtų senatvėje anūkams pasakoti visokias nesąmones, kaip kabėjau ant tvoros. M. Bulgakovas „Pastabos apie
JĖGOS IŠBANDYMAS
JĖGOS IŠBANDYMAS Kalinys Devyatajevas arogantiškam fašistui atsakė: „Vokietija neišvengiamai bus nugalėta! Naudojamas platus, nemalonus
JĖGOS IŠBANDYMAS
JĖGOS IŠBANDYMAS Seniausias Menšikovo paminėjimas datuojamas 1694 m.: rugpjūčio 29 d. caras išsiuntė laišką Archangelsko gubernatoriui Fiodorui Matveevičiui Apraksinui; Aleksaška Menšikovas buvo įtrauktas į sąrašą žmonių, kurie siuntė sveikinimus adresatui. „Alexashka“ minima kitame laiške,
Jėgos išbandymas
Jėgos išbandymas 1992 m. lapkričio 3 d. buvo atliktas pirmasis jėgos išbandymas. Tiksliau, rusai, dėl padorumo, buvo priversti eiti patruliuoti į kalną. Tačiau po dviejų dienų RDO pradėjo didelę operaciją už priešo linijų netoli Budkovy Walls. Penki iš jų, ginkluoti iki dantų, išvyko
Jėgos išbandymas
Jėgų išbandymas, Petrovičius mus daug ko išmokė. Neturėdamas prasmės jis greitai persikėlė į savo darbą ir tapo generaliniu konsultantu. Su jo pagalba geriau supratau krumpliaračių korekciją, taip pat sugebėjau išspręsti atvirkštines problemas: sugedusių krumpliaračių montavimas pagal dantis.
4 skyrius. Gelerio efektas
4 skyrius. Gelerio efektas Puikiai žinau, kad mano kelionė po Europą nebuvo lydima būtinos mokslinės kontrolės, kuri galėtų patvirtinti mokslininkų hipotezes apie energetinių jėgų, vadinamų „Gellerio efektu“, prigimtį ir kilmę. Ir vis dėlto tikiuosi, kad šie
Jėgos išbandymas
Jėgų išbandymas Sausis ėjo į pabaigą, o žiema negalėjo apginti savo teisių. Šalčiai užleido vietą atlydžiams. Iškrito šlapias sniegas ir iškart ištirpo. Niūrus švininis dangus pakibo virš miško ir Mosiro kaimo, kuriame išbuvome keturias dienas mintyse, viskas
"Kvapo testas"
„Kvapo testas“ Jei esate nekilnojamojo turto pirkėjas, kaip ir aš, žinote, kad visada kyla pagunda pasinerti į teorinius aspektus ir per daug susikoncentruoti į inžinerinę dalykų pusę. Jie siunčia jums informaciją apie komercinį pastatą, ir jūs ją gaunate
Gelerio fenomenas
Geller fenomenas XX amžiaus aštuntajame dešimtmetyje Stanfordo tyrimų institute buvo atlikti moksliniai eksperimentai su garsiu ekstrasensu Uri Geller, kurių metu jis lankstė ir laužė metalinius daiktus, ištrynė magnetofonus, dingo daiktai ir
Jėgos išbandymas
Jėgos išbandymas 2008 m. rugpjūtį Pentagono vadovo Roberto Geitso prognozės apie galimą ginkluotą konfliktą su Rusija atrodė gana tikroviškos. Pasinaudojęs Putino pasitraukimu iš prezidento posto ir Aukščiausiasis vadas, Vašingtonas nusprendė patikrinti Maskvos pasirengimą
Bandyti
Assay Assay (zondas, essai) ir tyrimų verslas – tai tauriųjų metalų ligatūrų, taip pat specialių kontrolės institucijų iš jų pagamintiems gaminiams skirtų ženklų, skirtų asmenims garantuoti tauriųjų metalų kiekį, nustatymas. nustato įstatymai
JĖGOS IŠBANDYMAS
JĖGOS IŠBANDYMAS Pradėdami skaityti šią knygą, atminkite, kad tas, kas jums ją padovanojo, galvojo apie jūsų gerovę ir gerovę, kaip ir mes. Skirkite laiko mūsų sistemos studijoms ir neskubėkite daryti išvadas remiantis tik savo
Bandyti
Bandymas Turite pradėti nuo tam tikros bandomosios versijos. Kodėl teste? Nes net jei surinkote daug informacijos, tai nereiškia, kad surinkote visą reikiamą informaciją. Todėl dažna klaida yra ta, kad žmonės iškart pradeda kažką daryti globaliai.
Jėgos išbandymas
Jėgų išbandymas Pirmaisiais pokario metais tarptautinius ryšius Sovietų futbolininkai. Dabar žymiai daugiau mūsų klubų žaidė draugiškas rungtynes su užsienio komandomis, nors dar ne su geriausiomis, bet vis dėlto šiuose susitikimuose mes
http://slovar.wikireading.ru/34558
Šaltinis: http://vekoff.ru/bolezni-i-lechenie/meditsinskie-znaniya/33846-koltsevaya-proba-gellera
Kokybinis baltymo nustatymas šlapime
› Straipsnių katalogas › Klinikiniai tyrimai › Šlapimo tyrimas
Darbo vietos, skirtos baltymų kiekiui šlapime nustatyti, sudėtis apima šiuos elementus:
- Cheminiai mėgintuvėliai, agliutinacijos mėgintuvėliai.
- Graduuotų pipečių rinkinys.
- Pipetės siauru ištrauktu galu.
- Alkoholinės lempos arba dujinis degiklis.
- Juodas popierius.
- Ledinė acto rūgštis.
- Sulfosalicilo rūgštis.
- Koncentruota azoto rūgštis.
- Distiliuotas vanduo.
Baltymų kiekio šlapime nustatymo metodai
Visi metodai, naudojami kokybiniam baltymų kiekiui šlapime nustatyti, yra pagrįsti baltymų krešėjimu. Baltymų lankstymas išreiškiamas įvairaus laipsnio drumstumas (nuo opalescencijos iki didelio drumstumo) arba dribsnių praradimas.
Kokybinis baltymo nustatymas šlapime gali būti atliekamas vienu iš šių būdų:
- virimas 10% acto rūgšties tirpalu;
- reakcija su 20% sulfosalicilo rūgšties tirpalu;
- reakcija su 50% azoto rūgšties tirpalu (Gellerio testas);
- reakcija su 1% azoto rūgšties tirpalu sočiame valgomosios druskos tirpale (modifikuotas Helerio testas pagal Larionovą).
Prieš kokybiškai nustatant baltymų kiekį šlapime, atliekami šie paruošiamieji darbai: 1. Drumstas šlapimas filtruojamas per popierinį filtrą. Jei nepavyksta gauti skaidraus filtrato, dar kartą perfiltruokite jį per tą patį filtrą arba sumaišykite šlapimą su nedideliu kiekiu infuzinio grunto ar talko, po to jis filtruojamas.2.
Jei šlapimas yra šarminis, jis rūgštinamas 10% acto rūgšties tirpalu iki silpnai rūgštinės reakcijos, kontroliuojant lakmusą arba universalų indikatorinį popierių.3.
4. Drumstumo laipsnis stebimas naudojant juodą foną. Kaip fonas naudojamas juodas kartonas arba juodas popierius, naudojamas fotografijoje. Atsižvelgiant į reakciją juodame fone, galite nustatyti mažiausią drumstumo laipsnį.
Sunumeruoti mėgintuvėliai dedami į atskirą stovą. Jie atlieka vieną iš toliau aprašytų reakcijų.
1. Bandykite verdant su 10% acto rūgšties tirpalu.Šiam tyrimui atlikti reikia 10% acto rūgšties tirpalo, kuris paruošiamas taip: 10 ml ledinės acto rūgšties supilama į cilindrą ir įpilama distiliuoto vandens iki 100 ml žymos.
Baltymų nustatymo technika.Į cheminį mėgintuvėlį įpilama 10-12 ml šiek tiek rūgštinės reakcijos filtruoto šlapimo. Tada viršutinė mėgintuvėlio dalis su šlapimu atsargiai pakaitinama iki virimo ir į ją įlašinama 8-10 lašų 10% acto rūgšties tirpalo.
Mėgintuvėlis su šlapimu žiūrimas juodame fone skleidžiamoje šviesoje. Esant baltymui šlapime, atsiranda įvairaus laipsnio drumstumas (nuo opalescencijos iki stipraus drumstumo) arba atsiranda dribsnių. Apatinė mėgintuvėlio dalis, kuri nebuvo šildoma, naudojama kaip kontrolė.
Šis tyrimas nustato baltymų kiekį nuo 0,015%o (%o - promilių).
2. Reakcija su 20% sulfosalicilo rūgšties tirpalu. 20% sulfosalicilo rūgšties tirpalas paruošiamas taip: 20 g sulfosalicilo rūgšties ištirpinama 70-80 ml distiliuoto vandens, supilama į 100 ml balioną ir iki žymės įpilama distiliuoto vandens. Paruoštas reagentas laikomas tamsaus stiklo inde.
Baltymų nustatymo technika.Į du vienodo skersmens mėgintuvėlius įpilama 2-3 ml filtruoto silpnai rūgštinės reakcijos šlapimo, į vieną iš mėgintuvėlių įlašinami 3-4 lašai 20% sulfosalicilo rūgšties tirpalo, kitas mėgintuvėlis naudojamas kaip mėgintuvėlis. kontrolė.
Jei mėgintuvėlyje su reagentu yra baltymų, atsiranda drumzlių arba iškrenta koaguliuoto baltymo dribsniai. Kontroliniame vamzdelyje skystis išlieka skaidrus.
Sulfosalicilo rūgštis kartu su serumo baltymu nusodina albumozes (peptidus), kurios yra baltymų skilimo produktas. Norint išsiaiškinti drumsto šlapimo priežastį, šildomas mėgintuvėlis su šlapimu.
Padidėja drumstumas, atsirandantis dėl išrūgų baltymų susidarymo, o drumstumas, kurį sukelia albumozė, išnyksta. Šis testas turi tokį patį jautrumą kaip ir ankstesnis.
3. Reakcija su 50% azoto rūgšties tirpalu (Gellerio testas). 50% azoto rūgšties tirpalas ruošiamas taip: į 50 ml azoto rūgšties, kurios savitasis tankis yra 1,2-1,4, įpilama 50 ml distiliuoto vandens (1:1 praskiedimas).
Baltymų nustatymo technika.Į siaurą mažą mėgintuvėlį (agliutinacijos purvą) supilama 1 ml 50% azoto rūgšties. 1 ml filtruoto tiriamojo šlapimo paimama į pipetę siauru pailgintu galu, sluoksniuojama ant reagento ir mėgintuvėlis perkeliamas į vertikalią padėtį. Kai yra baltymų, skysčio sąsajoje atsiranda baltas žiedas.
Žiedo atsiradimo laikas ir jo savybės priklauso nuo baltymų kiekio: jei baltymų mažai, žiedas atsiranda ne iš karto, todėl jo išvaizda stebima 2,5-3 minutes. Šiuo metodu nustatytas minimalus baltymų kiekis yra 0,033°/oo. Esant mažesniam baltymų kiekiui šlapime, žiedas nesusidaro.
Reakcijos rezultatai registruojami juodame fone skleidžiamoje šviesoje.
4. Reakcija su 1% azoto rūgšties tirpalu sočiame valgomosios druskos tirpale – modifikuotas Helerio testas (pagal Larionovą).
Bandymui atlikti naudokite 1% azoto rūgšties tirpalą, paruoštą sočiame valgomosios druskos tirpale (Larionova reagentas).
35 g valgomosios druskos ištirpinama 100 ml distiliuoto vandens, tirpalas filtruojamas, į 1 ml koncentruotos azoto rūgšties, kurios savitasis tankis 1,2-1,4, įpilama 99 ml paruošto sotaus valgomosios druskos tirpalo.
Baltymų nustatymo technika taip pat kaip ir reakcijoje su 50% azoto rūgšties tirpalu (Gellerio testas), tačiau vietoj 1 ml 50% azoto rūgšties tirpalo į mėgintuvėlį pilama 1 ml Larionovos reagento ir ant jo užpilama 1 ml šlapimo. tai. Balto žiedo atsiradimas skysčių sąsajoje rodo, kad tiriamame šlapime yra baltymų. Larionovos testas yra toks pat jautrus kaip Helerio testas.
5. Kolorimetrinis (sausas) testas kokybiniam baltymų nustatymui. Kolorimetrinis (sausas) testas, skirtas kokybiniam baltymų kiekiui šlapime nustatyti, yra pagrįstas baltymų poveikiu buferinio tirpalo indikatoriaus spalvai.
Baltymų nustatymo technika. Indikatoriaus popieriaus gabalas, skirtas baltymams nustatyti, trumpam panardinamas į šlapimą. Testas laikomas teigiamu, jei popieriaus lapas pasidaro mėlynai žalias.
Baltymų kiekio šlapime kiekybinis nustatymas
kiekybinis įvertinimas Baltymų kiekis šlapime pagrįstas tuo, kad kai šlapimas, kuriame yra baltymų, yra sluoksniuojantis 50% azoto rūgšties tirpalu arba Larionovos reagentu, dviejų skysčių ribose susidaro baltas žiedas, o jei skaidrus baltas žiedas pasirodo per 3 minutes. , tada baltymų kiekis yra 0,033 % o arba 33 mg 1000 ml šlapimo. Žiedo atsiradimas anksčiau nei po 3 minučių rodo didesnį baltymų kiekį šlapime.
Kiekybiškai nustatant baltymų kiekį šlapime, laikomasi šių taisyklių:
- Kiekybinis baltymų nustatymas atliekamas tik tose šlapimo dalyse, kuriose jis buvo aptiktas kokybiškai.
- Nustatymas atliekamas kruopščiai filtruotu šlapimu.
- Griežtai laikomasi tiriamojo šlapimo sluoksniavimo 50% azoto rūgšties tirpalu arba Larionovos reagento technikos reagento ir šlapimo santykiu (1:1).
- Žiedo atsiradimo laikas nustatomas naudojant chronometrą: galutinai apskaičiuojant baltymų kiekį, atsižvelgiama į šlapimo sluoksniavimosi ant azoto rūgšties laiką, kuris yra 15 sekundžių.
- Šlapimo skiedimas atliekamas pagal žiedo savybes. Tokiu atveju kiekvienas paskesnis šlapimo skiedimas ruošiamas iš ankstesnio.
- Žiedai identifikuojami juodame fone.
Labiausiai paplitę yra du kiekybinio baltymo nustatymo šlapime metodai: Roberts-Stolnikov-Brandberg metodas ir S. L. Ehrlich ir A. Althauzen metodas.
- Robertso-Stolnikovo-Brandbergo metodas. Pagal šį metodą baltymo kiekis šlapime nustatomas jį skiedžiant tol, kol kitą kartą šlapimą sluoksniuojant 50% azoto rūgšties tirpalu arba Lariono reagentu, žiedas pasirodo lygiai po 3 minučių. Baltymų kiekis apskaičiuojamas 0,033% padauginus iš šlapimo praskiedimo laipsnio. Gautas rezultatas išreiškia baltymų kiekį miligramais 1000 ml šlapimo, t.y., promilės (%o).
- S. L. Ehrlich ir A. Ya Althauzen metodas.Į stovą dedama eilė agliutinacijos mėgintuvėlių, į kuriuos pirmiausia įpilama 1 ml 50 % azoto rūgšties tirpalo arba Larionovos reagento. Tiriamasis šlapimas imamas atskira, švaria, sausa pipete siauru, ištrauktu galu ir sluoksniuojama ant reagento, po to įjungiamas chronometras. Žiedo atsiradimo laikas stebimas pastačius mėgintuvėlį ant juodo fono. Pasirodžius žiedui, chronometras išjungiamas.
Sluoksniuojant šlapimą, priklausomai nuo baltymų kiekio, gali atsirasti kompaktiškas, platus arba siūlą primenantis žiedas. Padėjus šlapimą ant reagento iš karto atsiranda kompaktiškas platus žiedas. Į siūlą panašus žiedas gali pasirodyti iš karto, nepraėjus vienai minutei arba per vieną ar keturias minutes.
Jei per 1–4 minutes atsiranda į siūlą panašus žiedas, šlapimo skiesti nereikia!
Baltymų kiekiui apskaičiuoti šiuo atveju pakanka pasinaudoti autorių pasiūlytu lentelės planu (1 lentelė).
1 pavyzdys. Kai šlapimas buvo sluoksniuotas ant reagento, per 2 minutes susidarė į siūlą panašus žiedas. Jei žiedas būtų susiformavęs per 3 minutes, baltymų kiekis būtų buvęs 0,033%.
Šiuo atveju žiedas susiformavo anksčiau. Atitinkama korekcija pagal plano lentelę 2 minučių laikui lygi 1+1/8. Tai reiškia, kad baltymo tam tikroje šlapimo dalyje bus 1+1/8 karto daugiau nei 0,033°/oo, ty 0,033%o X(1+1/8) = 0,037°/oo.
Kai per 1 minutę, t. y. po 40–60 sekundžių, atsiranda siūlą primenantis žiedas, vieną kartą atskieskite šlapimą 1,5 karto (2 dalys šlapimo + 1 dalis vandens), o tada praskiestą šlapimą vėl uždėkite ant reagento ir užrašykite išvaizdą. žiedo. Skaičiuojant rezultatus atsižvelgiama į tai, kad šlapimas buvo praskiestas 1,5 karto.
2 pavyzdys. Sluoksniavus 1,5 karto atskiestą šlapimą, per 2 minutes atsirado į siūlą panašus žiedas. Jei žiedas būtų atsiradęs 3 minutes, baltymas būtų buvęs 0,033%. Atitinkamas pakeitimas pagal plano lentelę 2 minučių laikui yra 1+1/8. Baltymų šlapime yra 0,033%oX1,5X(1+1/8) = 0,056%o.
Jei iš karto atsiranda į siūlą panašus žiedas, šlapimas skiedžiamas 2 kartus (1 dalis šlapimo + 1 dalis vandens). Praskiestas šlapimas vėl uždedamas ant reagento ir po 1 minutės pastebimas žiedo atsiradimas.
3 pavyzdys. Sluoksniuojant 2 kartus praskiestą šlapimą ant reagento, po 1 minutės 15 sekundžių atsirado siūlų pavidalo žiedas. Tada baltymų kiekis tiriamame šlapime, analogiškai su ankstesniais skaičiavimais, bus lygus 0,033%oХ2Х(1+3/8) = 0,091. Plataus žiedo atveju šlapimas skiedžiamas 4 kartus ( 1 dalis šlapimo + 3 dalys vandens).
Vėliau sluoksniuojant praskiestą šlapimą, į siūlą panašus žiedas gali susidaryti prieš minutę arba po jos. Tokiais atvejais baltymų kiekis apskaičiuojamas pagal analogiją su ankstesniais pavyzdžiais, ty 0,033% o dauginamas iš praskiedimo laipsnio ir atitinkamos pataisos.
1 pavyzdys. Atskiedus šlapimą 4 kartus, iš karto atsirado žiedas. Šlapimas skiedžiamas 2 kartus. Sluoksniavus šlapimą, praskiestą 8 kartus (4X2), per 1,5 minutės susiformavo į siūlą panašus žiedas.
Šiuo atveju baltymų kiekis yra 0,033%oX8X1,25 = 0,33%o ir kt.
Kai atsiranda kompaktiškas žiedas, šlapimas praskiedžiamas 8 kartus (1 dalis šlapimo + 7 dalys vandens).
Kai atskiestas šlapimas vėliau dedamas ant reagento, gali susidaryti kompaktiškas, platus arba į siūlą panašus žiedas.
2 pavyzdys. Kai šlapimas buvo sluoksniuotas ant azoto rūgšties, iškart susidarė kompaktiškas žiedas. Šlapimas skiedžiamas 8 kartus (1 dalis šlapimo + 7 dalys vandens) ir vėl sluoksniuojamas. Tai vėl sukūrė kompaktišką žiedą.
Tada šlapimas skiedžiamas dar 8 kartus (tam į cilindrą ar mėgintuvėlį paimkite 1 dalį praskiesto šlapimo ir įpilkite 7 dalis vandens). Po dar vieno atskiesto šlapimo sluoksniuojimo iš karto susidarė į siūlą panašus žiedas. Šlapimas skiedžiamas 2 kartus (1 dalis šlapimo + 1 dalis vandens).
Po dar vieno atskiesto šlapimo sluoksniuojimo per 2 minutes susiformavo į siūlą panašus žiedas. Baltymų kiekis tam tikroje šlapimo porcijoje apskaičiuojamas taip: 0,033.%oX8X8X2X(1+1/8) = 4,8%o.
Be plano lentelės, yra lentelė su apskaičiuotomis baltymų skaičiais (2 lentelė). Jei šlapimas neskiestas, baltymų kiekis pateikiamas stulpelyje „Visas, neskiestas šlapimas“. Skiedžiant šlapimą sveikuoju skaičiumi kartų (8,4,2), naudokite lentelę. 1. Skiedžiant šlapimą 1,5 karto, naudokite lentelę. 2.
Lentelės naudojimo būdas baltymų kiekiui šlapime nustatyti
Atitinkamuose lentelės stulpeliuose nurodykite žiedo atsiradimo laiką ir šlapimo praskiedimo laipsnį.
Skaičius, esantis horizontalių ir vertikalių linijų, nubrėžtų iš šių dviejų rodiklių, susikirtimo taške, rodo baltymų kiekį tiriamame šlapime (%o).
Gali būti, kad esant teigiamam kokybiniam baltymų testui, žiedas nesusidaro sluoksniuojant 50% azoto rūgšties tirpalu. Tai reiškia, kad šlapime yra mažiau nei 0,033% baltymų. Tokiais atvejais baltymų kiekis analizės formoje žymimas terminu „pėdsakai“.
Jei baltymas yra kiekybiškai įvertintas, baltymų kiekis promilėse nurodomas šlapimo analizės formoje, pavyzdžiui, „baltymai – 0,66 %o“.
Be kiekybinio baltymo nustatymo atskiroje šlapimo dalyje, apskaičiuojamas jo paros kiekis gramais. Tam surenkamas paros šlapimas, matuojamas jo kiekis ir nustatomas baltymų kiekis promilėse. Tada atliekamas skaičiavimas. Pavyzdžiui, paros šlapimo kiekis – 1800 ml, baltymų – 7°/oo. Tai reiškia, kad paros šlapimo kiekyje yra baltymų: 1,8X7 = 12,6 g.
Baltymų aptikimo principas pagrįstas jo denatūravimu, veikiant denatūruojančiam faktoriui – koncentruota azoto rūgštis arba Larionovos reagentas.
Reikėtų pažymėti, kad šlapime visada yra tam tikras baltymų kiekis, tačiau paprastai jo koncentracija sveiko žmogaus šlapime yra mažesnė už kokybinės reakcijos jautrumo slenkstį ir nenustatoma. paprasti metodai. Mėginys netinka baltymų kiekiui, viršijančiam 0,033 g/l. Esant didesnei koncentracijai, būtina atskiesti šlapimą arba naudoti Esbach albuminometrą.
Norint nustatyti kiekį viso baltymošlapime naudojamas metodas, pagrįstas Hellerio testu - Brandberg-Roberts-Stolnikov metodas (W. Roberts, 1830-1899, anglų terapeutas). Metodas apima šlapimo praskiedimą iki apatinės mėginio jautrumo ribos (0,033 g/l) ir žiedo susidarymo laiką 2-3 minutes.
Analizės progresas
Reagentai: koncentruota (rūkstanti) azoto rūgštis arba Larionovos reagentas. Tiriamas šlapimas turi būti skaidrus ir rūgštus.
Larionovos reagento paruošimas
Paruoškite prisotintą natrio chlorido tirpalą (20-30 g druskos ištirpinkite 100 ml šilto vandens, leiskite pastovėti, kol atvės). Supernatantas nupilamas ir filtruojamas. Į 99 ml filtrato įpilama 1 ml koncentruotos azoto rūgšties (galima pakeisti 2 ml druskos rūgšties).
Tyrimo technika
Maždaug tiek pat šlapimo atsargiai sluoksniuojame išilgai sienelės į mėgintuvėlį su 1-2 ml reagento. Esant baltymui, maždaug po 2-3 minučių skysčių sąsajoje pastebimas drumstumas – baltas denatūruoto baltymo žiedas.
Netiesa teigiamas rezultatas gali atsirasti vartojant azoto rūgštį dėl didelės nukleoalbumino arba uratų druskų koncentracijos. Pirmuoju atveju jis išnyksta, kai mėgintuvėlis šiek tiek papurtomas, o antruoju žiedas yra gerokai virš terpės sąsajos ir dingsta kaitinant; kartojant tyrimą su atskiestu šlapimu žiedas nesusidaro. Kartais rusvas pigmento žiedas atsiranda ir dėl urochromo oksidacijos azoto rūgštimi.
Larionovos reagento naudojimas, priešingai nei azoto rūgštis, turi nemažai privalumų: ties sluoksniavimo riba nesusidaro pigmentiniai žiedeliai, o teigiamas rezultatas suteikia aiškesnius baltyminius žiedus.
taip pat žr
Nuorodos
Literatūra
Wikimedia fondas. 2010 m.
Pažiūrėkite, kas yra „Gelerio testas“ kituose žodynuose:
GELLERIO TESTAS- ant baltymų (Heller), remiantis baltymų nusodinimu azotu. Jei į mėgintuvėlį įbersite kelis kubinius metrus. Valgome koncentruotą (rūkstančią) azoto rūgštį ir ant jos atsargiai sluoksniuojame tiriamąjį skystį, kad nesusimaišytų abu sluoksniai, tada, ... ... Didžioji medicinos enciklopedija
GELLERIO TESTAS- [pavadintas austrų patologo J.F. Hellerio vardu], kokybinio baltymo šlapime nustatymo reakcija. Remiantis baltymų krešėjimu, veikiant rūgštims. Atsargiai užtepkite tą patį ant 1 x 2 ml 50% azoto rūgšties tirpalo... ... Veterinarijos enciklopedinis žodynas
- (Šlapimas, Šlapimas, Lotium) skystis, išskiriamas per inkstus; daugiausia azoto turinčius organų ir kūno sulčių baltyminių medžiagų skilimo produktus, būtent: karbamidą, šlapimo rūgštį, kreatininą ir kt.; taip pat išskiria sieros rūgštis.... Enciklopedinis žodynas F.A. Brockhausas ir I.A. Efronas
Mėginio jautrumas yra 0,033 g/l, jis naudojamas proteinurijos klinikinei diagnostikai. Baltymų aptikimo principas pagrįstas jo denatūravimu, veikiant denatūruojančiam faktoriui – koncentruota azoto rūgštis arba Larionovos reagentas.
Reikėtų pažymėti, kad tam tikras baltymų kiekis visada yra šlapime, tačiau, kaip taisyklė, jo koncentracija sveiko žmogaus šlapime yra mažesnė už kokybinės reakcijos jautrumo slenkstį ir nėra aptinkama paprastais metodais. Mėginys netinka baltymų kiekiui, viršijančiam 0,033 g/l. Esant didesnei koncentracijai, būtina praskiesti šlapimą arba naudoti Esbach albuminometrą.
Bendro baltymo kiekiui šlapime nustatyti taikomas Hellerio testu paremtas metodas – Brandbergo-Robertso-Stolnikovo metodas (W. Roberts, 1830-1899, anglų terapeutas). Metodas apima šlapimo praskiedimą iki apatinės mėginio jautrumo ribos (0,033 g/l) ir žiedo susidarymo laiką 2-3 minutes.
Analizės progresas
Reagentai: koncentruota (rūkstanti) azoto rūgštis arba Larionovos reagentas. Tiriamas šlapimas turi būti skaidrus ir rūgštus.
Larionovos reagento paruošimas
Paruoškite prisotintą natrio chlorido tirpalą (20-30 g druskos ištirpinkite 100 ml šilto vandens, leiskite pastovėti, kol atvės). Supernatantas nupilamas ir filtruojamas. Į 99 ml filtrato įpilama 1 ml koncentruotos azoto rūgšties (galima pakeisti 2 ml druskos rūgšties).
Tyrimo technika
Maždaug tiek pat šlapimo atsargiai sluoksniuojame išilgai sienelės į mėgintuvėlį su 1-2 ml reagento. Esant baltymui, maždaug po 2-3 minučių skysčių sąsajoje pastebimas drumstumas – baltas denatūruoto baltymo žiedas.
Naudojant azoto rūgštį, dėl didelės nukleoalbumino arba uratų druskų koncentracijos gali atsirasti klaidingai teigiamas rezultatas. Pirmuoju atveju jis išnyksta, kai mėgintuvėlis šiek tiek papurtomas, o antruoju žiedas yra gerokai virš terpės sąsajos ir dingsta kaitinant; kartojant tyrimą su atskiestu šlapimu žiedas nesusidaro. Kartais rusvas pigmento žiedas atsiranda ir dėl urochromo oksidacijos azoto rūgštimi.
Larionovos reagento naudojimas, priešingai nei azoto rūgštis, turi nemažai privalumų: ties sluoksniavimo riba nesusidaro pigmentiniai žiedeliai, o teigiamas rezultatas suteikia aiškesnius baltyminius žiedus.
taip pat žr
Parašykite apžvalgą apie straipsnį "Gellerio testas"
Nuorodos
Literatūra
K:Wikipedia:Straipsniai be vaizdų (tipas: nenurodyta)Gelerio testą apibūdinanti ištrauka
Grafas vėl užėjo už pertvaros ir atsigulė. Grafienė priėjo prie Natašos, apversta ranka palietė jos galvą, kaip tai darydavo, kai sirgo dukra, tada palietė lūpomis kaktą, tarsi norėdama išsiaiškinti, ar nekarščiuoja, ir pabučiavo.- Tau šalta. Jūs drebate visą. Turėtum eiti miegoti“, – sakė ji.
- Eik į lovą? Taip, gerai, aš eisiu miegoti. „Dabar eisiu miegoti“, - pasakė Nataša.
Kadangi šįryt Natašai buvo pasakyta, kad princas Andrejus buvo sunkiai sužeistas ir važiuoja su jais, tik pirmąją minutę ji daug klausinėjo, kur? Kaip? Ar jis pavojingai sužeistas? ir ar jai leidžiama su juo susitikti? Tačiau po to, kai jai buvo pasakyta, kad ji jo nemato, kad jis sunkiai sužeistas, bet jo gyvybei pavojus negresia, ji, aišku, netikėjo tuo, ką jai sako, bet buvo įsitikinusi, kad kad ir kiek bekalbėtų, ji atsakytų tuo pačiu, nustojo klausinėti ir kalbėti. Visą kelią didelėmis akimis, kurias grafienė taip gerai pažinojo ir kurios veido grafienė taip bijojo, Nataša nejudėdama sėdėjo vežimo kampe ir dabar taip pat atsisėdo ant suoliuko, ant kurio atsisėdo. Ji galvojo apie kažką, ką sprendė arba jau buvo nusprendusi mintyse dabar - grafienė žinojo tai, bet kas tai buvo, ji nežinojo, ir tai ją gąsdino ir kankino.
- Nataša, nusirengk, mano brangioji, atsigulk ant mano lovos. (Tik grafienė viena turėjo paklotą lovą; m me Schoss ir abi jaunos ponios turėjo miegoti ant grindų ant šieno.)
„Ne, mama, aš gulėsiu čia ant grindų“, – piktai pasakė Nataša, priėjo prie lango ir atidarė jį. Adjutantas dejuoja iš atidarytas langas buvo girdimas aiškiau. Ji iškišo galvą į drėgną nakties orą, ir grafienė pamatė, kaip jos ploni pečiai dreba iš verksmo ir daužosi į rėmą. Nataša žinojo, kad dejuoja ne princas Andrejus. Ji žinojo, kad princas Andrejus guli tame pačiame ryšyje, kur jie buvo, kitoje trobelėje kitoje koridoriaus pusėje; bet ši baisi nepaliaujama aimana privertė ją verkti. Grafienė apsikeitė žvilgsniais su Sonija.
- Atsigulk, mano brangioji, gulėk, mano drauge, - tarė grafienė, lengvai ranka liesdama Natašos petį. - Na, eik miegoti.
„O, taip... aš eisiu miegoti“, – tarė Nataša, paskubomis nusirengdama ir nusiplėšdama sijonų virveles. Nusirengusi suknelę ir apsivilkusi švarką, ji susikišo kojas, atsisėdo ant grindų paruoštos lovos ir, užsimetusi per petį trumpą ploną pynę, ėmė pinti. Ploni, ilgi, pažįstami pirštai greitai, mikliai išardė, supynė ir surišo pynę. Natašos galva pasisuko įprastu gestu – iš pradžių į vieną, paskui į kitą pusę, bet karštligiškai atmerktos akys atrodė tiesiai ir nejudančios. Kai naktinis kostiumas buvo baigtas, Nataša tyliai nugrimzdo ant paklodės, padėtos ant šieno ant durų krašto.
„Nataša, atsigulk viduryje“, - pasakė Sonya.
„Ne, aš čia“, - pasakė Nataša. „Eik miegoti“, – suirzusi pridūrė ji. Ir ji įkišo veidą į pagalvę. Nedidelis baltymų kiekis paros šlapime randamas ir visiškai sveikiems asmenims, tačiau šiuo metu naudojamais metodais tokios mažos koncentracijos vienos porcijos neaptinkamos. Maždaug 70 % sveiko žmogaus šlapime esančių baltymų yra uromukoidas – baltymas, kuris yra inkstų audinio produktas; taigi, glomerulų baltymų dalis šlapime sveikų žmonių yra nereikšmingas, o proteinurija paprastai būna 50–150 mg per parą, dauguma šlapimo baltymų yra identiški serumo baltymams.
Priklausomai nuo pasireiškimo vietos, įprasta išskirti šias proteinurijos formas: prerenalinę, susijusią su padidėjusiu audinių baltymų irimu, sunkia hemolize; inkstų, kurią sukelia inkstų patologija, kurią galima suskirstyti į glomerulų ir kanalėlių; postrenalinis, susijęs su patologija šlapimo takų o dažniausiai sukelia uždegiminis eksudatas.
Priklausomai nuo egzistavimo trukmės, išskiriama nuolatinė proteinurija, egzistuojanti daugelį savaičių ir net metų, ir laikina, pasireiškianti periodiškai, kartais net nesant inkstų patologijos, pavyzdžiui, esant karščiavimui ir sunkiam apsinuodijimui.
Patartina atskirti proteinurijos kintamumą: kai baltymų netenkama iki 1 g per parą – vidutinio sunkumo, nuo 1 iki 3 g – vidutinio sunkumo ir daugiau kaip 3 g – sunkus.
Palyginti didelės molekulinės masės baltymų aptikimas šlapime rodo inkstų filtro selektyvumo trūkumą ir rimtą jo pažeidimą. Tokiais atvejais jie kalba apie mažą proteinurijos selektyvumą. Todėl dabar plačiai paplitęs šlapimo baltymų frakcijų nustatymas. Tiksliausi metodai yra krakmolo ir poliakrilamido gelio elektroforezė. Remiantis šiais metodais gautais rezultatais, galima spręsti apie proteinurijos selektyvumą.
Dauguma kokybinių ir kiekybinių baltymų šlapime nustatymo metodų yra pagrįsti jo krešėjimu šlapimo tūryje arba terpės (šlapimo ir rūgšties) sąsajoje; jei yra būdas išmatuoti krešėjimo intensyvumą, tada mėginys tampa kiekybinis.
Vieningas bandymas su sulfosalicilo rūgštimi:
Reikalingas reagentas:
20% sulfosalicilo rūgšties tirpalas.Tyrimo eiga:
3 ml filtruoto šlapimo supilama į 2 mėgintuvėlius.Į mėgintuvėlį įlašinami 6-8 lašai reagento. Tamsiame fone kontrolinis mėgintuvėlis lyginamas su mėgintuvėliu. Drumstumas mėgintuvėlyje rodo, kad yra baltymų, mėginys laikomas teigiamu.
Jei šlapimo reakcija yra šarminė, tada prieš tyrimą jis parūgštinamas 2-3 lašais 10% acto rūgšties tirpalo.
Vieningas Brandberg-Roberts-Stolnikov metodas:
Metodas pagrįstas Helerio žiedo testu, kuris susideda iš to, kad esant azoto rūgšties ir šlapimo ribai, esant baltymui, jis koaguliuoja ir atsiranda baltas žiedas.Reikalingas reagentas:
30% azoto rūgšties tirpalas (santykinis tankis 1,2) arba Larionovos reagentas. Larionovos reagento paruošimas: kaitinant 20-30 g natrio chlorido ištirpinama 100 ml distiliuoto vandens, leidžiama atvėsti ir filtruojama. Į 99 ml filtrato įpilama 1 ml koncentruotos azoto rūgšties.Tyrimo eiga:
Į mėgintuvėlį supilama 1-2 ml azoto rūgšties (arba Larionovos reagento) ir tiek pat filtruoto šlapimo atsargiai sluoksniuojama palei mėgintuvėlio sienelę.Plonas baltas žiedas dviejų skysčių sąsajoje tarp 2 ir 3 minučių rodo, kad baltymų koncentracija yra maždaug 0,033 g/l. Jei žiedas atsiranda anksčiau nei po 2 minučių po sluoksniavimo, šlapimą reikia atskiesti vandeniu ir vėl sluoksniuoti jau praskiestą šlapimą. Šlapimo praskiedimo laipsnis parenkamas priklausomai nuo žiedo tipo, t.y. jo plotis, kompaktiškumas ir atsiradimo laikas. Jei į siūlą panašus žiedas atsiranda prieš 2 minutes, šlapimas skiedžiamas 2 kartus, jei platus - 4 kartus, jei kompaktiškas - 8 kartus ir kt. Baltymų koncentracija apskaičiuojama 0,033 padauginus iš praskiedimo laipsnio ir išreiškiama gramais 1 litrui (g/l).
Kartais baltas žiedas susidaro esant dideliam uratų kiekiui. Skirtingai nuo baltymų žiedo, uratų žiedas atrodo šiek tiek virš dviejų skysčių ribos ir ištirpsta švelniai kaitinant.
Baltymų šlapime kiekybinis nustatymas pagal drumstumą, susidariusį pridedant sulfosalicilo rūgšties:
Metodo principas:
Drumstumo intensyvumas baltymų krešėjimo sulfosalicilo rūgštimi metu yra proporcingas jo koncentracijai.Reikalingi reagentai:
1.3% sulfosalicilo rūgšties tirpalas.
2. 0,9 % natrio chlorido tirpalas.
3. Standartinis albumino tirpalas - 1% tirpalas (1 ml tirpalo, kuriame yra 10 mg albumino): 1 g liofilizuoto albumino (iš žmogaus ar galvijų serumo) ištirpinama nedideliame kiekyje 0,9% natrio chlorido tirpalo 100 talpos kolboje ml, o tada atskieskite iki žymės tuo pačiu tirpalu. Reagentas stabilizuojamas pridedant 1 ml 5% natrio azido tirpalo (NaN3). Laikant šaldytuve, reagentas tinka 2 mėn.
Speciali įranga – fotoelektrinis kolorimetras.
Tyrimo eiga:
Į mėgintuvėlį įpilkite 1,25 ml filtruoto šlapimo, įpilkite į 5 ml su 3% sulfosalicilo rūgšties tirpalu ir išmaišykite. Po 5 minučių jie išmatuojami fotoelektrokolorimetru, kai bangos ilgis yra 590–650 nm (oranžinis arba raudonas filtras), lyginant su kontroline medžiaga kiuvetėje, kurios optinio kelio ilgis yra 5 mm. Kontrolė yra mėgintuvėlis, kuriame 0,9% natrio chlorido tirpalo buvo įpilta į 1,25 ml filtruoto šlapimo iki 5 ml. Skaičiavimas atliekamas pagal kalibravimo grafiką, kurio konstrukcijai paruošiami skiedimai iš standartinio tirpalo, kaip nurodyta lentelėje.Iš kiekvieno gauto tirpalo paimama 1,25 ml ir apdorojama kaip eksperimentiniai mėginiai.
Tiesinė priklausomybė sudarant kalibravimo grafiką išlaikoma iki 1 g/l. Esant didesnei koncentracijai, mėginys turi būti atskiestas ir skaičiuojant turi būti atsižvelgiama į praskiedimą.
Klaidingai teigiami rezultatai gali būti gauti, jei šlapime yra kontrastinių medžiagų, kurių sudėtyje yra organinio jodo. Todėl testas negali būti naudojamas asmenims, vartojantiems jodo papildus; Klaidingai teigiamas rezultatas taip pat gali būti dėl sulfatinių vaistų vartojimo, didelių penicilino dozių ir didelės šlapimo rūgšties koncentracijos šlapime.
Biureto metodas:
Metodo principas:
Baltymų peptidiniai ryšiai su šarminėmis vario druskomis sudaro violetinį kompleksą. Baltymai nusodinami trichloracto rūgštimi.Reikalingi reagentai:
1. 10 % trichloracto rūgšties tirpalas.2. 20 % vario tirpalas (CuSO4∙5H2O).
3. 3 % NaOH tirpalas.
Tyrimo eiga:
Į 5 ml šlapimo, paimto iš paros kiekio, įpilkite 3 ml trichloracto rūgšties tirpalo ir centrifuguokite iki pastovaus tūrio nuosėdų. Supernatantas išsiurbiamas pipete, po to nuosėdos ištirpinamos 5 ml NaOH tirpalo. Į tirpalą įpilama 0,25 ml CuSO4, mišinys maišomas ir centrifuguojamas. Skystis supernatantas yra fotometuojamas esant 540 nm bangos ilgiui kiuvetėje, kurios optinis kelias yra 10 mm, prieš distiliuotą vandenį. Baltymų koncentracija apskaičiuojama naudojant kalibravimo kreivę, ją konstruojant ordinačių ašyje brėžiama baltymų koncentracija (g/l), o abscisių ašyje – optinis tankis ekstinkcijos vienetais. Remiantis gauta koncentracija, apskaičiuojamas paros baltymų netekimas šlapime.Indikatoriaus popieriaus (juostelių) naudojimas:
Baltymus galima aptikti naudojant indikatorinį popierių (juosteles), kuriuos gamina Albuphan, Ames (Anglija), Albustix, Boehringer (Vokietija), Comburtest ir kt.Principas pagrįstas kai kurių rūgščių-šarmų rodiklių vadinamosios baltymų paklaidos reiškiniu. Popieriaus indikatorinė dalis impregnuota tetrabromfenolio mėlynuoju ir citratiniu buferiu. Kai popierius sudrėkinamas, buferis ištirpsta ir užtikrina tinkamą pH indikatorių reakcijai.
Esant 3,0-3,5, baltymų amino grupės reaguoja su indikatoriumi ir pakeičia jo pradinę geltoną spalvą į žalsvai mėlyną, po to, palyginus su spalvų skale, galima apytiksliai įvertinti baltymų koncentraciją tiriamame šlapime. Pagrindinė sąlyga, kad bandymo juostelės tinkamai veiktų, yra užtikrinti pH 3,0–3,5 diapazone, kad reakcija įvyktų.
Jei popierius kontaktuoja su tiriamu šlapimu ilgiau nei nurodyta instrukcijoje, tuomet citratinis buferis jame ištirpsta, o tada indikatorius reaguoja į tikrąjį šlapimo pH, t.y. duoda klaidingai teigiamą reakciją. Dėl ribotos buferio talpos, net ir laikantis metodinių nurodymų, per šarminiai šlapimo mėginiai (pH > 6,5) gamina klaidingai teigiami rezultatai, ir per rūgštaus šlapimo mėginiuose (pH
Reaguojančių amino grupių skaičius atskirų baltymų sudėtyje yra skirtingas, todėl albuminai reaguoja 2 kartus intensyviau nei toks pat kiekis γ-globulinų (Bence-Jones baltymas, paraproteinai), ir daug intensyviau nei glikoproteinai. Tačiau jei yra daug gleivių, kuriose yra daug glikoproteinų (su šlapimo takų uždegimu), ant indikatoriaus juostelės nusėdę gleivių dribsniai gali duoti klaidingai teigiamus rezultatus.
Indikatoriaus popieriaus atskirų gamybos partijų, taip pat atskirų tos pačios įmonės gaminamo popieriaus rūšių jautrumas gali skirtis, todėl baltymų kiekybinį nustatymą šiuo metodu reikia vertinti atsargiai. Nustatyti paros baltymų netekimą šlapime naudojant indikatorinį popierių neįmanoma. Taigi indikatorinis popierius yra prastesnis už cheminius tyrimus, pirmiausia bandymą su sulfosalicilo rūgštimi, nors jis leidžia greitai ištirti mėginių seriją.
Bence Jones baltymo aptikimas šlapime:
Bence-Jones baltymas gali išsiskirti su šlapimu sergant mieloma, Waldenströmo makroglobulinemija.Patartina atlikti tyrimą tik tuo atveju, jei testas su sulfosalicilo rūgštimi yra teigiamas. Indikatoriaus popierius netinka Bence Jones baltymui aptikti.
Principas:
Remiantis termoprecipitacijos reakcija. Metodai, kuriais įvertinamas Bence-Jones baltymo ištirpimas 100 °C temperatūroje arba pakartotinis nusodinimas vėliau atvėsus, yra nepatikimi, nes ne visi Bence-Jones baltymų kūnai turi atitinkamas savybes. Patikimiausias šio paraproteino aptikimas yra jo nusodinimas 40–60 °C temperatūroje, tačiau net ir tokiomis sąlygomis kritulių gali nebūti per daug rūgštiniame šlapime (pH 6,5), esant mažam santykiniam šlapimo tankiui ir maža Bence Jones baltymų koncentracija.Reikalingi reagentai:
2 M acetatinis buferis pH 4,9.Tyrimo eiga:
Išfiltruotas 4 ml šlapimas sumaišomas su 1 ml buferio ir 15 minučių šildomas vandens vonioje 56 ° C temperatūroje. Esant Bence-Jones baltymams, ryškios nuosėdos atsiranda per 2 minutes, jei Bence-Jones baltymo koncentracija yra mažesnė nei 3 g/l, mėginys gali pasirodyti neigiamas. Praktiškai tai labai reta, nes dažniausiai Bence Jones baltymo koncentracija šlapime yra reikšminga.Visiškai užtikrintai Bence Jones baltymą galima aptikti imunoelektroforetiniais tyrimais, naudojant specifinius serumus prieš sunkiąsias ir lengvas imunoglobulinų grandines.
Albumozės (proteozės) apibrėžimas:
Albumozės yra baltymų skilimo produktai, kurių nustatymo principas grindžiamas tuo, kad verdant jos nekrešėja, bet duoda teigiamą biureto reakciją ir yra išsūdomos tam tikromis druskomis, ypač amonio sulfatu ir cinko acetatu. rūgštinė aplinka.Įprastame šlapime albumozės nėra. Pėdsakai gali būti įprastame šlapime, jei yra sėklinio skysčio priemaišos. Patologijos atveju albumozės gali atsirasti šlapime karščiavimo sąlygomis, perpilant kraują ir plazmą, rezorbuojantis eksudatams ir transudatams, irnt navikams.
Reikalingi reagentai:
1. Sotusis natrio chlorido tirpalas.2. Koncentruotas natrio hidroksido tirpalas.
3. Silpnas vario sulfato tirpalas (beveik bespalvis).
Tyrimo eiga:
Į acto rūgštimi parūgštintą šlapimą pilamas sotusis natrio chlorido tirpalas (1/3 tūrio), užvirinamas, o karštas skystis filtruojamas. Albumozės patenka į filtratą, kuriame jų buvimą lemia biureto reakcija. Į filtratą įlašinama 1/2 tūrio koncentruoto natrio hidroksido tirpalo ir keli lašai silpno vario sulfato tirpalo. Teigiamas testas rodo raudonai violetinę spalvą.Jei testas su sulfosalicilo rūgštimi yra teigiamas, šlapimas pašildomas. Jei drumstumas išnyksta ir vėl atsiranda atvėsus, tai reiškia, kad šlapime yra albumozės arba Bence-Jones baltymo kūno.
Metodo principas:
Santykinis šlapimo tankis paprastai yra 1,015-1,025 g/cm 3 . Santykinis šlapimo tankis nustatomas naudojant specialius mažus hidrometrus, vadinamus urometrais. Urometrai yra dviejų tipų: pirmasis – mažo ir normalaus santykinio tankio šlapimui (su padalomis nuo 1000 iki 1030 g/cm3), antrasis – didelio santykinio tankio šlapimui (su padalomis nuo 1030 iki 1060 g/cm3).
PROGRESAS
Į mažą tokio skersmens cilindrą, kad urometras jame laisvai plūduriuotų, supilkite tiriamąjį šlapimą palei sienelę ir atsargiai įmerkite į jį urometrą. Skaitymas atliekamas urometro skalėje paimant liniją, atitinkančią apatinį skysčio menizą. Visi nustatymai atliekami 20 0 C temperatūroje, nes urometro skalė kalibruojama pagal šią temperatūrą. Jei šlapimas turi skirtingą temperatūrą, tada už kiekvieną 3 0 C viršijančią šią temperatūrą reikia pridėti, o už kiekvieną 3 0 C žemiau - atimkite 0,001 iš urometro skalės rodmens.
Patologinių šlapimo komponentų nustatymas
1. Kokybinės reakcijos į baltymų aptikimą šlapime – a) Helerio testas su koncentruota azoto rūgštimi
Metodo principas:
Koncentruota mineralinė rūgštis HNO 3 sukelia baltymų denatūraciją ir sudaro sudėtingas baltymų druskas su rūgštimi. Ties dviejų skysčių sluoksnių riba susidaro mažo balto žiedo pavidalo nuosėdos.
Progresas
Į mėgintuvėlį supilama 1 ml koncentruoto HNO 3, mėgintuvėlis pakreipiamas 45 0 kampu ir pipete atsargiai išilgai sienelės sluoksniuojama 1 ml šlapimo.
b) mėginys su koncentruota sulfosalicilo rūgštimi
Metodo principas:
Koncentruota organinė sulfosalicilo rūgštis sukelia baltymų denatūravimą. Baltymų nusodinimas nuosėdų arba drumstumo pavidalu yra susijęs su baltymų dalelių dehidratacija ir sudėtingų baltymų druskų su rūgštimis susidarymu.
Progresas
Į 1 ml šlapimo įlašinkite 3 lašus 20% sulfosalicilo rūgšties. Kai šlapime yra baltymų, susidaro baltos nuosėdos.
2. Baltymų kiekio šlapime kiekybinis nustatymas naudojant
testas - Albufan juostelės.
Metodo principas:
Testas pagrįstas „baltymų klaidų indikatoriaus“ principu. Reaktyviojoje zonoje yra deguonies buferis ir specialus indikatorius, kuris, esant baltymams, keičia spalvą nuo geltonos iki žalios iki mėlynos.
Tyrimas yra labai jautrus albuminui ir reaguoja į jo buvimą šlapime, kai koncentracija yra 0,10-0,15 g/l. Didelės molekulinės masės baltymai, tokie kaip imunoglobulinai, matuojami mažesniu jautrumu nei albuminai. Mažos molekulinės masės baltymai, tokie kaip beta-2 mikroglobulinas ir Bence Jones baltymai, šiuo tyrimu praktiškai neaptinkami.
Testo įvertinimas: testas laikomas teigiamu, jei pasikeičia reaktyviosios zonos spalva. Priklausomai nuo albumino koncentracijos šlapime, reaktyvioji zona gali pasirodyti nuo žalios iki mėlynos spalvos. Šie atspalviai lyginami su spalvų skale, kurios zonos atitinka 0,3, 1, 3, 10 g/l baltymų koncentracijas.
PROGRESAS
Neliesdami rankomis reaktyviosios zonos, nuleiskite tyrimo juostelę į tiriamąjį šlapimą 1-2 sekundėms, kad zona sušlaptų. Tada iš juostelės pašalinkite šlapimo perteklių ir maždaug po 1 minutės palyginkite indikacinės zonos spalvą su rinkinio spalvų skale ir nustatykite baltymų kiekį, kuris išreiškiamas g/l.
